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胱抑素CElisa試劑盒使用時注意事項都有哪些?

點擊次數:1025 更新時間:2022-08-23

  胱抑素C是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質,是一種半胱氨*蛋白酶抑制劑。編碼基因屬于管家基因,能在所有的有核細胞內以恒定速度持續(xù)轉錄與表達,無組織特異性。其分子量小(13KD),生理條件下帶正電荷,能自由從腎小球濾過,*被腎小管上皮細胞重吸收并于細胞內降解,不重新回到血液中;同時腎小管上皮細胞也不分泌胱抑素C至管腔內。

  胱抑素CElisa試劑盒檢測原理:
  采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的抗原會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物*化的抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗體與結合在包被抗體上的抗原結合、生物*與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,胱抑素CElisa試劑盒在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中指標的濃度。
  胱抑素CElisa試劑盒使用注意事項:
  標本宜在新鮮時檢測,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
  凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
  渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
  反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
  ELISA實驗標準曲線平直,一般有以下原因:標準曲線制備是否不當,洗孔不凈,吸孔不充分,讀數不準確或是吸量誤差。查找原因,即可找到相應解決方案。
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