97精品人妻系列无码人妻,国产福利一区二区三区在线观看,小雪被老汉各种姿势玩弄,人人澡人摸人人添学生AV

產(chǎn)品目錄   Product catalog
聯(lián)系我們   Contact
搜索   Search
技術(shù)文章   Article首頁>>技術(shù)文章>>視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

點(diǎn)擊次數(shù):588 更新時(shí)間:2024-05-30

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


上一篇 人整合素α4酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟 下一篇 猴slit同源物2ELISA檢測試劑盒注意事項(xiàng)

021-69985169
13611928337

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
最近最新的日本字幕MV| 日本少妇无码精品12P| 日本XXXB孕妇孕交视频| 成品网站W灬源码三叶草下载| 久久久久亚洲av成人无码电影| 久久亚洲精品成人AV无码网站| 丰满人妻熟女色情A片| 久久人人爽人人爽人人片AV高清| 性开放的交换艳妇俱乐部| 国产乱码一区二区三区| 久久精品人妻无码一区二区三区盗| 无码人妻精品一区二区三区9厂| 粗大黑头紫大黑头紫挤进| 久久久久亚洲AV无码专区电影| 哔哩哔哩免费观看入口| 国产成人精品三上悠亚久久| 女人高潮久久久叫人喷水| 熟女chachacha性少妇| 最近2019中文字幕大全视频1| 少妇的肉体k8经典| 一区二三国产好的精华液| 民工把我奶头掏出来了怎么办| 激情综合色综合啪啪开心| 欧美成人精品a片免费一区99| 色婷婷综合久久久久中文| 欧美av| 日韩夜夜高潮夜夜爽无码| 国内精品久久久久影院欧美| 久久国产精品-国产精品| 被闺蜜男朋友强肉H高干| 日本免费一区二区三区高清视频| 野花香高清视频在线观看免费| 亚洲av无码专区在线播放中文| 特黄做受又粗又大又硬老头| 亚洲乱码无码永久不卡在线| 男妓用舌头舔我高潮不退| 性饥渴老太XXXXXHD| 久久久久99精品成人片直播| 97精品一区二区视频在线观看| 漂亮少妇高潮a片xxxx| 动漫精品一区二区三区在线观看|