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ELISA試劑盒步驟及原理

點(diǎn)擊次數(shù):941次 更新時(shí)間:2016-11-30

ELISA試劑盒步驟及原理

      基本原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ENA-78會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素??筂ouse ENA-78抗體與結(jié)合在包被抗體上的Mouse ENA-78結(jié)合、與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液,發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光,用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值(CL),ENA-78濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān),通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中ENA-78的濃度。

操作步驟:

1、在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各 100μL,37℃孵育90分鐘

2、倒去孔內(nèi)液體,拍干,加入 100μL  化抗體工作液,37℃孵育 60 分鐘

3、洗滌 3 次

4、加入 100μL 酶結(jié)合物工作液, 37℃孵育 30 分鐘

5、洗滌 5 次

6、加入 100μL 底物溶液, 37℃孵育 5 分鐘左右

7、讀數(shù)

基本原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ENA-78會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素??筂ouse ENA-78抗體與結(jié)合在包被抗體上的Mouse ENA-78結(jié)合、與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液,發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光,用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值(CL),ENA-78濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān),通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中ENA-78的濃度。

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